Имеются ли прямые доказательства колинеарности гена и кодируемого им белка?


Имеются ли прямые доказательства колинеарности гена и кодируемого им белка?
Рейтинг: 5.0/1
Просмотров: 48 | Добавил: (21.12.2020) (Изменено: 21.12.2020)

Всего ответов: 1

Обсуждение вопроса:
Всего ответов: 1
Аватар
0

21.12.2020 оставил(а) комментарий:
Порядок чередования оснований в гене обусловливает последовательность чередования аминокислотных остатков в молекуле белка, кодируемого этим геном. Такая колинеарность структуры гена и структуры контролируемого им белка доказана при проведении серии скрещиваний, в результате которых была составлена карта мутаций в гене 23, детерминирующем первичную структуру основного белка головки фага Т4. Исследование первичной структуры этого белка показало, что он представляет собой простую полипептидную цепь, которая при обработке трипсином и химотрипсином распадается на восемь фрагментов, выделяемых с помощью электрофореза. В эксперименте использовались так называемые амбер-мутанты, у которых в мутантном сайте появился кодон АТЦ, при транскрипции превращавшийся в кодон УАГ в молекуле иРНК. Амбер-мутации являются стоп-сигналом (терминирующим кодоном) при синтезе белка. Из бактерий, зараженных тем или иным мутантом фага, выделялся фаговый белок (в клетки добавлялась 14С-аминокислота после заражения фагом так, что весь фаговый белок, образующийся в клетке, был радиоактивным и его было легко отделить от клеточного белка). Различные мутанты образовывали белок, распадающийся на меньшее число фрагментов, чем белок дикого типа. Следовательно, чем меньше число обычных пептидных фрагментов выявляется у мутанта, тем короче полипептидная цепь, образуемая им, из-за наличия терминирующего кодона. Поскольку порядок этих нонсенс-кодонов отражается на размерах полипептидных цепей, образующихся у соответствующего мутанта, можно сделать вывод, что порядок кодонов и порядок аминокислот колинеарны. Наиболее наглядно колинеарность гена и белка продемонстрирована при сравнении локализации УФ-мутаций гена А триптофансинтетазы кишечной палочки и соответствующих замен аминокислотных остатков в ферменте. Было показано, что расстояния между изменившимися нуклеотидами в гене (в процессах рекомбинации) согласуются с расстояниями между изменившимися аминокислотами в полипептидной цепи.
avatar